Potato dextrose agar (PDA) er et godt halvt fast medium til almindeligt brug, der anvendes til dyrkning af svampe. Det bruges ofte til at isolere, vokse og vedligeholde svampedannende arter. Færdige petriskåle eller reagensglas indeholdende PDA kan købes, eller PDA kan hurtigt fremstilles ved hjælp af en kommerciel forblanding. Det er dog ikke svært at lave en enkel og effektiv version fra bunden til lave omkostninger.
kredit: Zedcor 100% ejet / PhotoObjects.net / Getty ImagesForberedelse af kartoffelekstrakt
Trin 1
Anbring kartofler i en gryde med ca. 1,2 liter vand fra vandet og kog på en komfur i 1 time.
Trin 2
Fjern gryden fra varmen, og lad væsken afkøle, indtil den kan håndteres behageligt (ca. 10 minutter).
Trin 3
Hæld flydende kartoffelekstrakt gennem en sil eller osteduk og opsamle den i en anden beholder.
Klargøring af mediet
Trin 1
Tilsæt dextrose og agar til 1 liter kartoffelekstraktvand.
Trin 2
Test opløsningens pH med pH-testpapir eller en pH-meter.
Trin 3
Hvis pH er over 6,5, skal du justere den ved at tilsætte en dråbe saltsyreopløsning ad gangen og prøve igen.
Trin 4
Hvis pH-værdien er under 6, skal du justere den ved at tilsætte en dråbe natriumhydroxidopløsning ad gangen og prøve igen.
Sterilisation
Trin 1
Bland mediet grundigt og opdele det i mindre portioner på 250 ml hældt i de fire 500 ml kolber (Bemærk: hver kolbe må ikke være mere end halvt for at undgå kogning over).
Trin 2
Dæk hver kolbe med et stykke løst sammenkrøbt aluminiumsfolie, så folien ikke falder af, men ikke får en tæt tætning.
Trin 3
Placer kolberne i en trykkomfur.
Trin 4
Betjen komfuret i overensstemmelse med producentens instruktioner om sterilisering af PDA ved 121 grader C (250 grader F) ved et tryk på 103.421 Pascals (15 PSI) i 15 minutter.
Trin 5
Sluk for komfuret, og lad det vende tilbage til atmosfærisk tryk, fjern derefter kolberne og lad dem afkøle, indtil de kan håndteres.
Hælde mediet
Trin 1
Stil de sterile petriskåle op på en plan overflade.
Trin 2
Når kolberne er afkølet til håndteringstemperatur, men inden mediet begynder at stivne, skal du gribe en kolbe med den ene hånd og fjerne det og sæt dets foliedæksel til side med den anden hånd.
Trin 3
Løft låget med en hånd til hver petriskål, fyld hurtigt halvvejs med flydende PDA, og sæt låget på igen.
Trin 4
Gentag trin 3 ovenfor, indtil alt petriskål er fyldt.
Trin 5
Hvis der er noget PDA tilbage, skal kolben løst løsnes med det originale folielåg, lad det afkøle og størkne, spænd foliedækslet og opbevares i køleskab.
